产品货号：
BTN81102
中文名称：
石蜡包埋组织RNA提取试剂盒
英文名称：
FFPE RNA Extraction Kit
产品规格：
30次
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品是我司开发的专门用于从石蜡包埋切片中快提RNA的试剂盒。
石蜡包埋切片是珍贵的分子生物学研究材料，但是其保存时间一般都比较长，很不容易从中提取到可以进行RT-PCR的RNA样本，存在的主要问题是RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。
保存：室温，但蛋白裂解液、RNase-free水收到后需置于-20℃保存。有效期一年。
本制品足够30次微量提取，每次可以处理5片切片。
75%乙醇
相关搜索：石蜡包埋组织RNA提取试剂盒，石蜡包埋切片，沉淀法，RNA提取，RNA纯化，FFPE RNA Extraction Kit
石蜡包埋切片是珍贵的分子生物学研究材料，但是其保存时间一般都比较长，很不容易从中提取到可以进行RT-PCR的RNA样本，存在的主要问题是RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。
- 一管式操作，避免了可能的交叉污染和样品RNA的丢失。
- 适用于甲醛固定和非甲醛固定的两类切片。
- 含一步离心式脱蜡试剂，不需要使用有毒的二甲苯，健康环保。
- 沉淀法，比过柱法和磁珠法能更好的回收高度降解的RNA片段。
- 能有效去除基因组DNA的污染，避免DNA的干扰。
- 得到的RNA可直接用于RT-PCR反应。
- 本制品只能用于科研。
| 组分 | 规格 |
| 石蜡包埋切片RNA纯化溶液A | 30mL |
| 石蜡包埋切片RNA纯化溶液B | 3mL |
| 蛋白裂解液 | 5mL |
| 蛋白去除剂（RNA专用） | 15mL |
| 微量核酸沉淀剂 | 30mL |
| RNase-free水 | 1mL |
保存：室温，但蛋白裂解液、RNase-free水收到后需置于-20℃保存。有效期一年。
本制品足够30次微量提取，每次可以处理5片切片。
75%乙醇
- 将5片厚度为6～8μm的石蜡包埋切片转移到1.5mL塑料离心管(最好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL石蜡包埋切片RNA纯化溶液A，在振荡器上以最大速度振荡10秒。
- 加入75μL石蜡包埋切片RNA纯化溶液B，在振荡器上以最大速度振荡10秒。
- 7000×g室温离心2分钟，溶液将形成上下两个相，其中组织切片位于下层。
- 小心吸弃上层液体。
- 将离心管放入真空离心机中抽干下层的液体，一般需要一小时。
- 加入150μL蛋白裂解液，55℃保温过夜。
- 短暂离心，95℃保温10分钟。
- 加入0.5mL蛋白去除剂（RNA专用），充分震荡半分钟。
- 13000～15000×g室温离心3～5分钟。
- 将无色上清液（约0.6mL）转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相（蓝色）和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的DNA。
- 在上清液中加入两倍体积的微量核酸沉淀剂，振荡器上振荡30秒混匀。
- 14000g室温离心5分钟，离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果需要提高RNA回收率，可以将离心时间延长到20或30分钟。
- 小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
- 在含RNA沉淀的离心管中加入1mL自备的75%乙醇，振荡混匀30秒。
- 14000g室温离心1分钟。
- 小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
- 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃沉淀。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
- 室温放1～2分钟后立即加入50μL RNase-free水使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。样品立即使用或存放于-80℃待用。
- RNA产量产率测定：将5～10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5～8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度（1OD260的RNA=40μg/mL），进而计算出RNA的产量（浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
- RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8～2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。
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